一、 儀器介紹

實驗目的：

本試驗是一項生殖細胞致突變試驗（yàn）,用來檢測受試物對整體哺乳動物生（shēng）殖（zhí）細胞的遺傳損傷,進一步確證體（tǐ）外試驗或其他試驗（yàn）係統獲得的陽性結果,以評價受試物能否引起顯性致死突變。

實驗概述：

哺乳動物發育中的精子在物理或（huò）化學因素作用（yòng）下,發生染（rǎn）色體損傷（shāng）,從而使受精卵在發育中死亡引起顯性致死的染（rǎn）色體損傷主要為染（rǎn）色體斷裂。顯性致死的主要表現是受精卵著床（chuáng）前丟失或著床後胚

胎（tāi）早期死亡。通過適（shì）當的途徑使雄性動物接觸受試物（wù）,然後與未經染毒且未交配過的雌性動物交配,交配結束後,取出雌性動物。雌性動物於妊娠後半期處死,剖開腹腔,取出子宮,檢査兩側子宮內的胚胎植入數（著床數）、早死胎、晚（wǎn）死胎（tāi）和活胎數。雄性動物每間隔一定時間再（zài）與另一（yī）批未經染毒且未交配過的雌性動物交配,如（rú）此共進行數批,以保證覆蓋一個（gè）精（jīng）子周期。

應用範圍

應用於（yú）科（kē）研、農業、衛生、教育、霧霾狀（zhuàng）態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符（fú）合標準：

GB/T 15670.18-2017《農藥登記毒理學試驗方法第18 部分:齧齒類動物（wù）顯性致死試驗》

二、試驗流程

1）實驗動物：

物種: 通常選用性成熟的健康雄性大鼠或小（xiǎo）鼠（如SD大（dà）鼠（shǔ）、CD-1小鼠）

數量: 每組至（zhì）少15隻雄鼠，設多個劑量組（zǔ）和陰性/陽性對照組。

雌鼠: 需未交配過的（de）健康雌（cí）鼠（shǔ），用於與（yǔ）雄（xióng）鼠交配。

2）給藥劑量分組:

至少設3個劑量組，高劑量（liàng）應出現輕微毒性（如體重（chóng）減（jiǎn）輕）。

陰性對照組如體重減輕（溶劑對照）和陽性對照組（如環磷酰胺、絲裂黴素（sù）C等已（yǐ）知致突變劑）

給藥方式:通常為經口灌胃，連續給藥5~7天（tiān）（覆蓋精子（zǐ）發（fā）生周期不（bú）同階段）

3）交配程序

交配安（ān）排:雄鼠給藥後，按（àn）周次與未處理雌鼠交配（每周更（gèng）換一（yī）批雌鼠，共5~6批），以覆（fù）蓋精子發生全周期（精原細胞（bāo）一（yī）精子）。

交配比（bǐ）例:通常1雄:2雌，每日檢查陰栓（交配證據）

4）觀察（chá）指標：

胚胎存活分析

雌鼠（shǔ）妊娠中期解剖，計數黃體數、著床數（shù）、活（huó）胎數和死（sǐ）胎數（shù）。

計（jì）算顯性（xìng）致死率:

其他（tā）指標: 雄鼠體重、睾丸重量、精子質量等,

5）結果（guǒ）評價：

陽性結果:顯性致死率（lǜ）顯著升（shēng）高（gāo）（如劑（jì）量依賴性增加，或（huò）某批（pī）交配周期異常），提示受試農藥可能誘發生殖（zhí）細胞遺傳損傷（shāng）。

陰性結果:需結合其（qí）他遺（yí）傳毒性試驗（yàn）綜合評估。